物體發(fā)什么顏色的光是因為它吸收了其它顏色的光而反射該顏色的光，如FITC能吸收可見光譜中的藍色光，而發(fā)射黃綠色熒光。熒光的強度遠弱于激發(fā)光，波長要長于激發(fā)光，這一點大家都知道。激發(fā)濾光片的作用是除去波長與熒光光譜段相同的那部分激發(fā)光，即激發(fā)光中長波段。發(fā)射濾光片/接收濾光片：從熒光中除去短波部分激發(fā)光(注意，仍是針對激發(fā)光)。

所以，熒光設備應是如此工作，激發(fā)光源發(fā)射出激發(fā)光，到達激發(fā)濾光片后被除去與發(fā)射熒光重合部分的長波段，然后到達熒光團，發(fā)射長波熒光，再到達發(fā)射濾光片，被除去低于此熒光波長的短波激發(fā)光，得到波段狹窄的熒光，從而不受強度遠大于熒光本身的激發(fā)光干擾。

濾光片如標有cut-in 515，則表示515以上的波段能通過，依此類推。而透析袋是cut-off 5KDa，表示5000以上分子量不能通過。但濾光片并不能精確截止某個波段的光，而只是一個正態(tài)分布高斯峰的最高點。

截止型濾光片：通過長于某個特定波長的濾光片，如只能通過大于700nm的激發(fā)光。

帶通濾光片：通過某個特定波長范圍內(nèi)的濾光片，如700-800nm。